Adenovīrusa ātrais tests - deguna sekrēcija

Paredzētais lietojums:

SARS-CoV-2 nukleīnskābes testa komplekts ir paredzēts COVID-19 nukleīnskābju kvalitatīvai noteikšanai nazofaringeālās uztriepes, mutes un rīkles uztriepes un krēpās. Testa rezultāti nodrošina molekulārās diagnozes pamatu infekcijām vai aizdomām par pacientiem, un tos nevajadzētu izmantot kā vienīgo klīniskās diagnozes kritēriju.

Materiāli:

Pārbaudes procedūra:

A. Parauga sagatavošana

Ekstrahēta RNS ir SARS-CoV-2 nukleīnskābes testa komplekta izejmateriāls.

Svarīgi: katra nukleīnskābes ekstrakcijas procedūra jāveic vienlaikus ar vienu pozitīvo kontroli (40 μL, atšķaida ar steriliem sāls šķīdumiem/PBS līdz vajadzīgajam tilpumam) un vienu negatīvo kontroli (40 μL, atšķaida ar steriliem sāls šķīdumiem/PBS līdz vajadzīgajam tilpumam).

Ieteicams izmantot šādus komerciālos nukleīnskābju ekstrakcijas komplektus: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Vīrusu RNS Mini komplekts (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA Kit (TIANGEN);

B. Reakcijas maisījuma iestatīšana

1. Pirms lietošanas visi reaģenti un paraugi ir pilnībā jāatkausē, pilnībā jāsamaisa un īsi centrifugēti istabas temperatūrā (aptuveni 18–25 grādi).

2. Sagatavojiet nepieciešamo Reaction Mix tilpumu atbilstoša izmēra polipropilēna mikrocentrifūgas mēģenē.

3. Ar pipeti ievadiet 25 µL reakcijas maisījuma katrā vajadzīgajā atbilstošas ​​optiskās 96-iedobes reakcijas plāksnes iedobē vai atbilstošas ​​optiskās reakcijas mēģenes.

C. Veidnes pievienošana

1. Pievienojiet 5 μL ekstrahētas RNS no paraugiem/pozitīvās kontroles/negatīvās kontroles. Kopējais tilpums ir 30 μL.

2. Rūpīgi samaisiet paraugus un kontroles ar Reaction Mix, pipeti uz augšu un uz leju/Vortex.

3. Aizveriet 96-iedobes reakcijas plāksni ar atbilstošiem vākiem vai optisko līmplēvi un reakcijas caurules ar atbilstošiem vākiem.

4. Centrifugējiet 96-iedobes reakcijas plāksni centrifūgā ar mikrotitrēšanas plāksnes rotoru 30 sekundes ar aptuveni 2500 apgr./min.

D. Reāllaika PCR instrumenta programmēšana

Pamatinformāciju par dažādu reāllaika PCR instrumentu iestatīšanu un programmēšanu skatiet attiecīgā instrumenta lietotāja rokasgrāmatā. Pārbaude ir optimizēta ABI7500 reāllaika PCR sistēmai. PCR palaišana tiek veikta ar cikla nosacījumiem, kā aprakstīts tālāk esošajā tabulā.

Definējiet fluorescences detektorus

*Lūdzu, iestatiet instrumenta fluorescences iekšējo atsauci uz "Nav", piemēram: ABI sērijas instrumentiem iestatiet "Passive Reference" uz "None".

E. Datu analīze

Lūdzu, iestatiet analīzes parametrus un analizējiet datus saskaņā ar attiecīgo instrumentu lietošanas instrukcijām.

Kā piemēru ņemiet ABI 7500:

Bāzes līnija ir jāiestata uz diapazonu, kas novērš fona fluorescenci, kas konstatēta pastiprināšanas agrīnajos ciklos, bet kas nepārklājas ar apgabalu, kurā pastiprinājuma signāli paceļas virs fona (sākuma vērtība: 3–10; beigu vērtība: {{2} }). Cikla slieksnim (Ct) jābūt eksponenciālās fāzes pamatā. Noklikšķiniet uz "Analīze", lai automātiski iegūtu analīzes rezultātu, un izlasiet noteikšanas rezultātu logā "Pārskats".

Populāri tagi: adenovīrusa ātrais tests-deguna sekrēcija, Ķīna, piegādātāji, ražotāji, rūpnīca, beztaras